10%一步法AB液蛋白快速制胶试剂盒
货号:P0105
存储条件:APS,-30~-15℃保存,≤0℃运输,可在2~8℃保存至少3个月;其他组分,2~8℃保存。
产品简介:
10% AB液蛋白快速制胶试剂盒适用于蛋白聚丙烯酰胺凝胶的快速制备。本试剂盒采用上层胶和下层胶的预混配方,只需将试剂两两混合,加入促凝剂即可凝胶,简便快捷。所配的上层胶带有颜色,方便点样和区分不同凝胶。试剂盒提供的改良型促凝剂APS,具有良好的稳定性和促凝效果,配胶过程中无需添加TEMED。本试剂盒可配制125块mini PAGE胶(以 0.75 mm厚度胶计算)。
产品组分
portant;"> 组分
portant;"> 货号
portant;"> P0105
portant;"> 上层胶A液
portant;"> P0105-1
portant;"> 80 ml
portant;"> 上层胶B液
portant;"> P0105-2
portant;"> 80 ml
portant;"> 下层胶A液(10%)
portant;"> P0105-3
portant;"> 250 ml
portant;"> 下层胶B液
portant;"> P0105-4
portant;"> 250 ml
portant;"> APS
portant;"> P0105-5
portant;"> 8 ml
凝胶浓度选择参照
portant;"> 货号
portant;"> 试剂盒浓度
portant;"> 蛋白最佳分离范围
portant;"> P0065
portant;"> 6%
portant;"> 50-150KD
portant;"> P0085
portant;"> 8%
portant;"> 30-130KD
portant;"> P0105
portant;"> 10%
portant;"> 20-100KD
portant;"> P0125
portant;"> 12%
portant;"> 10-70KD
portant;"> P0155
portant;"> 15%
portant;"> 10-55KD
操作流程:
以制备一块0.75/1.0/1.5 mm的PAGE胶为例。
下层胶配方
portant;"> 凝胶厚度
portant;"> 下层胶A液
portant;"> 下层胶B液
portant;"> APS
portant;"> 0.75mm
portant;"> 2.0ml
portant;"> 2.0ml
portant;"> 40ul
portant;"> 1.0mm
portant;"> 2.7ml
portant;"> 2.7ml
portant;"> 60ul
portant;"> 1.5mm
portant;"> 4.0ml
portant;"> 4.0ml
portant;"> 80ul
上层胶配方
portant;"> 凝胶厚度
portant;"> 上层胶A液
portant;"> 上层胶B液
portant;"> APS
portant;"> 0.75mm
portant;"> 0.5ml
portant;"> 0.5ml
portant;"> 10ul
portant;"> 1.0mm
portant;"> 0.75ml
portant;"> 0.75ml
portant;"> 15ul
portant;"> 1.5mm
portant;"> 1.0ml
portant;"> 1.0ml
portant;"> 20ul
1. 各组分在使用前请颠倒混匀6-8次。
2. 下层胶配制:取等体积下层胶A液和下层胶B液,各2.0/2.7/4.0 ml,混匀。
3. 上层胶配制:取等体积上层胶A液和上层胶B液,各0.5/0.75/1.0 ml,混匀。
4. 向步骤2的混合溶液中加入40/60/80 μl的APS,立即充分混匀,然后注入制胶玻璃板中,使液面距短玻璃板上沿约1.5cm。
注1:此溶液一般过量,请勿全部注入。
注2:混匀操作避免剧烈振荡,在灌注的过程中避免将气泡灌入制胶玻璃板中。
注3:灌注下层胶后用ddH2O或醇封闭,待下层胶凝固后再灌注上层胶。
5. 向步骤3的混合溶液中加入10/15/20μl的APS,立即充分混匀,无需等待下层胶凝固,即可将混匀后的溶液轻缓注入制胶玻璃板中,轻轻插入梳齿。
注:灌注上层胶溶液可沿着长玻璃板轻缓注入,避免将下层胶冲散。
6. 待胶凝固后(室温约20-30 min),拔去梳齿即可用于电泳。
注:请尽量使用新鲜配制的电泳缓冲液。
更多详情:
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